PURIFIKASI ENZIM PROTEASE DARI TANAMAN BIDURI (Calotropis gigantea)

Abstract

Protease merupakan enzim penghidrolisa protein, yaitu enzim yang memutus ikatan peptida pada rantai protein sehingga dihasilkan asam amino atau peptida berantai pendek. Enzim protease memiliki peranan penting dalam industri pangan, seperti pembuatan keju, penjernih bir, pengempuk daging, pembuatan roti dan sebagainya. Ketersediaan enzim protease belum mencukupi kebutuhan sementara pemakaian protease bagi industri pangan cenderung meningkat. Oleh karena itu perlu dicari sumber protease baru, salah satunya adalah biduri (Calotropis gigantea) yang merupakan tanaman lahan kering yang memiliki aktivitas proteolitik pada getahnya. Enzim hasil ekstraksi protease dari tanaman biduri merupakan isolat dengan kadar yang masih rendah, maka perlu dilakukan purifikasi enzim protease biduri. Purifikasi adalah proses pemurnian atau pemisahan enzim dari komponenkomponen

selain enzim. Purifikasi perlu dilakukan untuk karakterisasi protease biduri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui metode purifikasi yang sesuai untuk enzim protease dari tanaman biduri, sehingga didapatkan enzim protease yang relatif murni dengan aktivitas spesifik yang tinggi. Parameter yang diamati adalah total protein, kadar protein, total aktivitas dan aktivitas spesifik enzim protease biduri. Serta dilakukan elektroforesis untuk mengetahui kemurnian enzim protease biduri dan berat molekulnya. Hasil pengamatan dianalisa secara deskriptif untuk mengetahui metode yang sesuai untuk purifikasi enzim protease biduri. Hasil penelitian menunjukan bahwa metode yang sesuai untuk purifikasi enzim protease dari tanaman biduri adalah kromatografi dengan gel filtrasi sephadex G-25, yang dilanjutkan dengan kromatografi penukar ion positif carboxymethyl sephadex C-50. Dengan total protein 1,355 mg, kadar protein 1,641%, total aktivitas 0,081 unit, aktivitas spesifik 0,059 unit/mg. Berat molekul enzim protease biduri adalah sebesar 25,18 kD.