Analisis Aktivitas Apirase Fraksi Protein 67 kDa Kelenjar Saliva Aedes albopictus

Abstract

Arbovirus merupakan salah satu masalah kesehatan global karena sekitar 80% penduduk dunia berisiko mengalami penyakit yang ditularkan melalui vektor. Nyamuk Aedes dikenal sebagai vektor kompeten dari empat arbovirus utama, yaitu virus dengue, chikungunya, demam kuning, dan Zika. Transmisi virus dari vektor ke inang vertebrata terjadi secara horizontal melalui proses blood-feeding. Proses blood feeding dibantu oleh protein-protein yang ada di dalam kelenjar saliva. Protein ini berperan sebagai penghambat agregasi platelet, antikoagulan, antiinflamasi, dan sebagainya. Protein yang terdapat dalam kelenjar saliva Aedes albopictus diketahui merupakan protein imunogenik, yaitu terletak pada fraksi 31 kDa, 47 kDa, dan 67 kDa. Komponen dari fraksi protein 67 kDa diduga sebagai apirase. Apirase adalah enzim yang dapat menguraikan ADP dan ATP menjadi AMP dan fosfat anorganik. Apirase mempermudah hematofagi dengan menghambat agregasi platelet yang dipicu oleh ADP pada inang karena ADP yang terhidrolisis dapat memutus sinyal aktivasi dan agregasi platelet. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas apirase pada fraksi protein 67 kDa kelenjar saliva Ae. albopictus yang diukur melalui kemampuannya dalam menghambat agregasi platelet. Metode yang digunakan dalam penelitian meliputi landing collection, rearing, identifikasi spesies Ae. albopictus, isolasi kelenjar saliva, isolasi fraksi protein 67 kDa dengan SDS-PAGE, purifikasi protein dengan elektroelusi dan dialisis, preparasi platelet rich plasma (PRP), dan uji agregasi platelet dengan metode agregometri microplate reader dengan pembacaan nilai absorbansi pada panjang gelombang 595 nm. Sampel PRP didapat dari 10 penduduk sehat Jember dan prosedur pengambilan sampel darah dilakukan setelah memperoleh persetujuan responden melalui informed consent dan berdasarkan ethicalclearance No. 4726/UN25.1.10.2/KE/2025. Uji agregasi platelet dibagi menjadi beberapa perlakuan, yaitu kontrol positif aspirin (konsentrasi 2 mg/ml dan 0,5 mg/ml), kontrol negatif (PBS pH 7,4), fraksi protein 67 kDa dan crude extract protein kelenjar saliva Ae. albopictus (konsentrasi 0,5 mg/ml).