PEMURNIAN PRODUK HIDROLISIS ENDO-β-1,4-D-XILANASE ASAL Bacillus sp. DENGAN KROMATOGRAFI FILTRASI GEL

Abstract

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kasar endo-β-1,4-D-xilanase yang dimurnikan dengan 50% amonium sulfat dan dialisis memiliki aktivitas spesifik tertinggi yaitu 1,4 U/mg. Kromatografi lapis tipis digunakan untuk identifikasi produk hidrolisis endo-β-1,4-D-xilanase dengan xilan oat pada pH 5, suhu 40 oC selama 15 jam menghasilkan noda-noda yang berhimpit antara xilosa, xilobiosa, xilotriosa, xiloteraosa, dan xilopentaosa. Hasil tersebut menunjukkan pemisahan pada KLT belum optimum. Profil xilooligosakarida dari Sephadex G-25 terdeteksi pada fraksi 13-28, sedangkan profil xilooligosakarida dari Sephadex G-15 terdeteksi pada fraksi 11-22. Pemurnian dengan Sephadex G-15 dapat memisahkan xilooligosakarida dari xilosa dibanding dengan Sephadex G-15. Analisis menggunakan kromatografi cairan kinerja tinggi memperkuat hasil KLT, bahwa jenis produk hidrolisis endo-β- 1,4-D-xilanase adalah xilosa, xilobiosa, xilotriosa, xiloteraosa, dan xilopentaosa. Xilopentaosa sebagai produk utama hidrolisis xilan oat dengan endo-β-1,4-D-xilanase asal Bacillus sp. memiliki kadar 2079,53 ppm (42,8%), sedangkan xilooligosakarida jenis xilotriosa (33,90 ppm), xilobiosa (12,67 ppm) dan xilotetraosa (11,85 ppm) memiliki kadar yang jauh lebih kecil. Berdasarkan hasil penelitian ini, xilobiosa, xilotriosa, xiloteraosa, xilopentaosa, dan sedikit xilosa merupakan jenis atau komponen penyusun produk hidrolisis endo-β-1,4-D-xilanase. Xilopentaosa merupakan produk utama dari hidrolisis endo-β-1,4-D-xilanase dengan xilan oat. Xilooligosakarida yang diperoleh dapat dimanfaatkan sebagai prebiotik untuk meningkatkan pertumbuhan bakteri menguntungkan di dalam tubuh manusia.