ANALISIS PROFIL PROTEIN EKSTRAK AQUADES BIJI MIMBA (Azadirachta Indica A. Juss) DENGAN DAN TANPA PEMANASAN MENGGUNAKAN METODE SDS-PAGE

Abstract

Tanaman merupakan sumber bahan kimia terkaya. Komponen kimia tanaman banyak dimanfaatkan sebagai jamu atau obat tradisional, salah satunya adalah tanaman mimba. Bagian tanaman mimba yang paling banyak digunakan adalah daun dan biji mimba. Selama ini, penelitian terhadap khasiat mimba sebagai tanaman obat lebih banyak terfokus pada ekstrak kasar, dan belum banyak yang meneliti tentang komponen kimia mimba misal proteinnya. Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis profil protein ekstrak biji mimba dengan dan tanpa pemanasan sekaligus mengukur konsentrasi setiap fraksi proteinnya. Ekstrak biji mimba dibuat dengan mencampurkan 1 gram biji mimba yang telah dikeringkan dengan n-heksan dan tambahkan dengan 3 ml aquades dan 5 µg SDS. Ekstrak biji mimba dibagi menjadi dua bagian dalam microtube. Salah satu ekstrak dipanaskan salama 100 °C selama 3 menit sedangkan ekstrak yang lain tanpa pemanasan. Analisa profil protein menggunakan SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) dengan gel 12,5%. Pengukuran konsentrasi fraksi protein menggunakan metode Bradford dengan BSA sebagai standar. Hasil elektroforesis ekstrak aquades pada biji mimba dengan pemanasan didapatkan empat pita protein yaitu 56 kDa, 33 kDa, 23 kDa, dan 20 kDa dengan konsentrasi setiap fraksi protein secara berturut-turut adalah 1,31 µg/µl; 2,50 µg/µl,; 3,35 µg/µl; dan 3,33 µg/µl. Pada ekstrak biji mimba tanpa pemanasan didapatkan empat pita protein yaitu 105 kDa, 27 kDa, 23, kDa , dan 20 kDa dengan konsentrasi fraksi protein secara berturut-turut adalah 0,56 µg/µl ; 1,44 µg/µl; 2,37 µg/µl; dan 2,52 µg/µl. Terdapat dua pita protein yaitu 23 kDa dan 20 kDa yang sama pada ekstrak biji mimba dengan dan tanpa pemanasan, ini menunjukkan fraksi protein biji mimba yang stabil pada pemanasan. Konsentrasi protein pada biji mimba dengan dan tanpa pemanasan berturut-turut adalah 10.51 µg/µl dan 6.91 µg/µl. Penelit ian lebih lanjut dibutuhkan untuk menganalisa fraksi-fraksi protein biji mimba tersebut.