Pengembangan LDK (Lab Dalam Kepingan) Berbasis Kertas Untuk Deteksi Darah Dan Asam Urat Pada Sampel Urin Secara Simultan;

Abstract

Keberadaan darah dan asam urat dalam urin perlu senantiasa dipantau untuk mengetahui kondisi kesehatan seseorang. Hematuria adalah suatu gejala yang ditandai dengan adanya darah atau sel darah merah (eritrosit) dalam urin. Derajat hematuria tidak selalu sesuai dengan kelainannya, sehingga hematuria harus selalu dipertimbangkan sebagai gejala penyakit yang serius sampai dibuktikan sebaliknya. Sedangkan asam urat merupakan hasil akhir metabolisme purin. Keberadaannya normal ada di dalam darah dan urin namun jika jumlahnya berlebihan maka dapat menimbulkan penyakit gout yang ditandai dengan nyeri sendi dan timbulnya hematuria mikroskopis. Untuk memonitor kadar darah dan asam urat dalam urin dapat digunakan LDK sebagai sensor kimia dengan karakteristik tertentu yang dapat mendeteksi analit secara semikuantitatif dengan penglihatan mata biasa. LDK yang difabrikasi dengan teknik cetak sablon dan diimmobilisasi dengan teknik adsorbsi ini mengandung dua reagen, yaitu tetramethylbenzidine-cumene hydroperoxide pada area reagen darah dan kompleks besi-(III)tris-(1,10)-phenantrolin pada area reagen asam urat. Pada area reagen darah terjadi perubahan warna dari biru muda menjadi biru tua karena adanya hemoglobin dalam urin memicu reaksi oksidasi tetramethylbenzidine oleh cumene hydroperoxide. Sedangkan reaksi reduksi kompleks besi-(III)tris-(1,10)-phenantrolin oleh asam urat dalam urin menimbulkan perubahan warna dari kuning menjadi merah kekuningan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa bahan sablon yang sesuai untuk LDK merupakan campuran tinta pasta karet warna putih dan emulsifier dengan perbandingan 3:1, serta diwarna dengan tinta hitam. Sebagai matriks pendukung digunakan kertas saring halus merk ‘Whatman”. Kondisi optimum LDK antara lain: volume sampel optimum 80 µL; volume reagen optimum yaitu 1 µL untuk area reagen darah dan 0,5 µL untuk area reagen asam urat; pH optimum buffer sitrat untuk deteksi darah adalah 5 dan pH optimum buffer sitrat untuk deteksi asam urat adalah 6; konsentrasi optimum reagen deteksi darah yaitu Tetramethylbenzidine 20000 ppm dan Cumene hydroperoxide 3% serta konsentrasi optimum reagen deteksi asam urat yaitu Kompleks Besi (III) – Tris (1,10-Phenantrolin) 1000 ppm. Karakteristik LDK sebagai sensor kimia meliputi: daerah linier deteksi darah pada konsentrasi 0,30 - 6,0 ppm dan daerah linier deteksi asam urat pada konsentrasi 400 – 1000 ppm; LDK akurat untuk deteksi darah (% recovery 94,53 %) dan akurat untuk deteksi asam urat (% recovery 98,27 %); LDK presis pada deteksi darah konsentrasi 0,30 – 7,50 ppm dan presis pada deteksi asam urat konsentrasi 400 – 1000 ppm; limit deteksi darah sebesar 0,15 ppm dan limit deteksi asam urat sebesar 100 ppm; limit kuantifikasi darah sebesar 0,30 ppm dan limit kuantifikasi asam urat sebesar 400 ppm; LDK sensitif karena dibutuhkan perbedaan konsentrasi yang kecil untuk menimbulkan perubahan warna yang signifikan, yaitu 1,13 ppm untuk deteksi darah dan 21,74 ppm untuk deteksi asam urat; deteksi LDK tidak terganggu dengan adanya dua komponen matriks terbesar penyusun urin, yaitu urea dan natrium klorida, ditunjukkan dengan perbedaan ∆ mean Blue relatif kecil (0,2) untuk deteksi darah dan perbedaan ∆ mean Red relatif kecil (0,9) untuk deteksi asam urat; waktu respon LDK 2 menit untuk deteksi darah dan 5 menit untuk deteksi asam urat; LDK baik disimpan pada suhu dingin ±8 0 C dan tidak lebih dari 2 minggu; LDK sebagai sensor kimia dapat digunakan untuk mengukur kadar darah dan asam urat dalam sampel urin nyata secara simultan, dimana hasil yang diperoleh berupa kadar semikuantitatif.