TRANSFORMASI GEN SoSUT1 PADA TANAMAN TEBU (Saccharum officinarum L var. BL) MENGGUNAKAN Agrobacterium tumefaciens STRAIN GV 3101 DAN EKSPLAN PANGKAL TUNAS TEBU IN VITRO

Abstract

Sukrosa merupakan produk akhir asimilasi karbon selama proses fotosintesis yang terjadi pada organ daun. Sukrosa sebagai produk akhir asimilasi karbon ditanslokasikan dari daun Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan tanaman tebu transforman melalui proses transformasi menggunakan vektor A. tumefaciens yang membawa gen SoSUT1. Metode penelitian meliputi persiapan eksplan, pengkulturan A. tumefaciens, isolasi DNA plasmid untuk mengkonfirmasi keberadaan konstruk pAct-SoSUT1,transformasi menggunakan vektor A. tumefaciens meliputi tahap infeksi, kokultivasi, eliminasi, seleksi dan aklimatisasi. Tanaman putatif transforman yang telah berhasil diaklimatisasi, dilakukan isolasi DNA genom untuk kemudian dianalisis PCR. Hasil analisis PCR dengan primer hpt II menunjukkan bahwa dari 24 tanaman tebu putatif transforman yang berhasil diaklimatisasi, didapatkan 15 tanaman tebu transforman yang positif mengandung gen ketahanan antibiotik hygromycin, sehingga dapat dikatakan juga mengandung gen target SoSUT1. Efektifitas rata-rata transformasi gen SoSUT1 menggunakan eksplan pangkal tunas tebu in vitro sebesar 6,8% dengan persentase efektifitas transformasi pada transformasi pertama, kedua dan ketiga berturut-turut sebesar 10,34 % ; 4,6% dan 5,45%. Kode T1.1, T1.2, TI.3, T1.4, T1.6, T1.7, T1.8, T1.9, T1.10 dari transformasi pertama, kode T2.1, T2.2, T2.4 dari transformasi kedua dan kode T3.2, T3.5, T3.6 dari transformasi ketiga. Dari 24 tanaman putatif transforman yang dianalisis, terdapat 9 tanaman yang dinyatakan sebagai tebu non transforman dengan tidak terdeteksi adanya pita DNA hptII. Hal ini disebabkan karena adanya perlindungan sel non transforman