TEST-STRIP UNTUK UJI KUALITATIF DIAZEPAM MENGGUNAKAN REAGEN SPESIFIK YANG DIIMOBILISASI PADA MEMBRAN NATA DE COCO-CaCO

Abstract

Psikotropika khususnya diazepam saat ini telah banyak disalahgunakan, sehingga salah satu cara untuk menanggulangi masalah tersebut dibutuhkan penyediaan alat deteksi diazepam yang sederhana, murah, sensitif, cepat dan teliti, seperti test strip. Pengembangkan test strip berdasarkan reaksi warna cukup terbuka, dengan mengimobilisasi reagen ke dalam membran. Reagen spesifik dii mobilisasi secara entrapmen kedalam membran nata de coco-CaCO 3 . Adapun reagen spesifik yang digunakan untuk mendeteksi diazepam antara lain reagen Zimmermann dan reagen asam hidroklorida. Berdasarkan uraian tersebut, maka penelitian ini dilakukan bertujuan untuk mengetahui: (a) kelayakan reagen spesifik terhadap diazepam sehingga dapat memberikan warna yang signifikan, (b) pelarut diazepam apakah yang dapat memberikan respon terbaik terhadap reagen spesifik, (c) reagen manakah yang layak diimobilisasi di dalam membran nata de coco, (d) komposisi membran, filler dan reagen yang memberikan perubahan warna yang signifikan, dan kinerja test strip yang dihasilkan terhadap diazepam. Penelitian ini difokuskan pada pengembangan metode pendeteksi diazepam dengan menggunakan test strip pada media membran nata de coco-CaCO yang didalamnya terimobilisasi reagen spesifik secara entrapment. Pengembangan test strip diawali dengan melakukan kajian kelayakan reagen spesifik untuk diazepam dan kelayakan pelarut diazepam yang dilakukan dengan teknik color spot test, selanjutnya dilakukan optimasi komposisi membran dan kinerja reaksi dalam membran (waktu respon, limit deteksi, reprodusibilitas dan life time) serta dilakukan uji recovery terhadap diazepam. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa reagen yang memberikan perubahan warna yang signifikan dengan diazepam adalah reagen Zimmermann kali dari standar reagen Vienna dan reagen asam hidroklorida pekat. Diazepam yang memberikan warna signifikan pada saat bereaksi dengan reagen tersebut adalah diazepam yang dilarutkan dalam pelarut kloroform. Kedua reagen layak diimobilisasi di dalam membran nata de coco-CaCO . Komposisi optimum membran nata de cocoCaCO 3 3 untuk reagen Zimmermann adalah 100%:0% dan reagen asam hidroklorida komposisi 100%:0%. Hal ini menunjukkan bahwa penggunaan CaCO tidak menambah kemampuan test strip untuk mendeteksi diazepam. Kinerja test strip yang meliputi waktu respon test strip Zimmermann terhadap diazepam adalah 12 menit dan test strip asam hidroklorida adalah 8 menit. Hasil limit deteksi untuk test strip Zimmermann adalah 0.093 mg/mL dan test strip Asam hidroklorida 1 mg/mL. Test strip Zimmermann memiliki nilai reprodusibilitas 0.4%, test strip asam hidroklorida 0.34%. Hasil life time test strip Zimmermann adalah 53 hari dan test strip asam hidroklorida adalah 6 hari. Hasil uji recovery dilakukan ketika urin yang mengandung diazepam diekstrak terlebih dahulu menggunakan kloroform Perbandingan antar diazepam dalam urin dengan ekstrak kloroform adalah 1: 1. Hasil yang di dapat persen recovery adalah test strip Zimmermann 58.5%. Hal ini dikarenakan diazepam terlebih dahulu bereaksi di dalam urin yang kemudian diekstrak dengan kloroform, sedangkan pada test strip asam hidroklorida persen recovery sampel diazepam dalam media urin adalah 81.8%.