Genom Editing CRISPR/Cas9 Dengan Target Gen ACO1 pada Posisi Genom 682 untuk Tujuan Knock Out Enzim Pensintesa Etilen pada Tanaman Tomat

Abstract

Etilen merupakan hormon tanaman yang berperan penting dalam proses pematangan (ripening) buah klimakterik, termasuk tomat. Gen ACO1 merupakan salah satu anggota famili ACO (ACC oxidase) yang berfungsi pada tahap akhir jalur biosintesis etilen dengan mengkatalisis perubahan ACC (1-aminosiklopropana-1 karboksilat) menjadi etilen. Tingginya produksi etilen dapat mempercepat proses pematangan buah sehingga menyebabkan masa simpan tomat menjadi lebih singkat. Pada penelitian ini dilakukan pendekatan genome editing terhadap gen ACO1 menggunakan plasmid pRGEB32 yang dimediasi oleh Agrobacterium tumefaciens strain GV3101 guna menghasilkan knockout gen ACO1. Penelitian bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh knockout gen ACO1 terhadap biosintesis etilen pada tanaman tomat melalui transformasi genetik. Kegiatan penelitian dilaksanakan di Laboratorium Agrobioteknologi Fakultas Pertanian Universitas Jember. Hasil penelitian menunjukkan bahwa persentase perkecambahan benih tomat mencapai 96,6%, sedangkan persentase eksplan survive setelah infeksi dan co-cultivation mencapai 95,6% pada tunas apikal dan 94,9% pada kotiledon. Regenerasi tunas mencapai 35,62% pada eksplan tunas apikal dan 35,13% pada eksplan kotiledon. Seleksi menggunakan antibiotik hygromycin menghasilkan 11 putatif transforman dari tunas apikal dan 4 putatif transforman dari kotiledon.