Efek Seduhan Bubuk Cascara Kopi Robusta Freeze Dried Terhadap Produksi Radikal Superoksida Monosit yang Dipapar Streptococcus mutans

Abstract

Monosit sebagai sistem pertahanan tubuh yang mampu mengenal, menangkap, dan menghancurkan antigen saat terjadi inflamasi. Inflamasi terjadi salah satunya ketika monosit dipapar eksotoksin S. mutans yang kemudian melakukan proses fagositosis dan menghasilkan senyawa Reactive Oxygen Species (ROS) berupa radikal superoksida. ROS dalam konsentrasi yang tinggi akan menyebabkan terjadi kerusakan sel. Kerusakan sel akibat ROS dapat dihentikan apabila reaktivitasnya diredam oleh senyawa antioksidan. Antioksidan secara alami diproduksi oleh tubuh tetapi dalam jumlah yang terbatas. Antioksidan eksogen bisa didapatkan dari cascara kopi robusta. Cascara kopi robusta melalui berbagai proses pengolahan sebelum dapat dikonsumsi. Pengolahan cascara kopi robusta sangat berpengaruh terhadap kandungan antioksidan. Cascara kopi robusta freeze dried memiliki kandungan antioksidan lebih tinggi dibandingkan dengan cascara dengan pengolahan biasa. Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui efek seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried terhadap produksi radikal superoksida pada monosit yang dipapar S. mutans in vitro. Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratoris dengan rancangan the post test only control group design. Objek penelitian ini adalah isolat monosit vena perifer manusia yang diberi perlakuan seduhan cascara kopi robusta. Penelitian dilakukan pada bulan Februari-April 2024 di Laboratorium Bioscience RSGM Universitas Jember. Terdapat 3 kelompok pada penelitian ini, kelompok kontrol (monosit dan eksotoksin S. mutans), kelompok perlakuan I (monosit, seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried 1,5%, dan S. mutans), kelompok perlakuan II (monosit, seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried 3%, dan S. mutans). Metode isolasi monosit menggunakan single ficoll-paque density gradient centrifugation. Seduhan kopi pada perlakuan I didapatkan dengan melarutkan 3 gram bubuk cascara kopi robusta freeze dried dalam 200 ml dan pada perlakuan II didapatkan dengan melarutkan 6 gram bubuk cascara kopi robusta freeze dried dalam 200 ml. Pesentase jumlah monosit yang memproduksi radikal superoksida ditunjukkan dengan terbentuknya bercak biru-keungunan pada membran monosit yang merupakan formazan blue hasil reduksi NBT. Parameter yang digunakan pada penelitian ini yaitu menghitung persentase jumlah monosit yang memproduksi radikal superoksida dengan jumlah monosit seluruhnya tiap 100 sel. Hasil perhitungan kemudian dilakukan uji normalitas menggunakan uji Saphiro-Wilk dan untuk uji homogenitas menggunakan Lavene test dengan hasil p>0,05. Data yang dihasilkan berdistribusi normal dan homogen, kemudian dilakukan uji statisitik parametrik menggunakan One Way ANOVA dengan hasil p<0,05 dan uji LSD dengan hasil p<0,05. Hasil analisis data statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan pada seluruh kelompok penelitian. Hasil analisis statistik menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan I dan II. Hasil menunjukkan bahwa kelompok monosit yang memproduksi radikal superoksida tertinggi adalah kelompok monosit + eksotoksin S. mutans. Hal ini terjadi karena adanya paparan S. mutans yang menyebabkan produksi radikal superoksida meningkat. Kelompok monosit + seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried 3%, + S. mutans menunjukkan jumlah monosit yang memproduksi radikal superoksida lebih sedikit dibandingkan kelopok monosit, seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried 1,5%, dan S. mutans, tetapi tidak menunjukkan hasil yang terlalu signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried dapat meredam produksi radikal superoksida pada monosit. Kesimpulan penelitian ini adalah seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried terbukti dapat mengurangi produksi radikal superoksida pada monosit yang dipapar S. mutans. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai konsentrasi seduhan bubuk cascara kopi robusta freeze dried berbeda yang memiliki potensi pengurangan produksi radikal superoksida pada monosit.