Potensi Proteolitik Isolat Bakteri WAN 4 Asal Pantai Papuma, Jember

Abstract

Lautan mencakup lebih dari 70% permukaan bumi dan merupakan ekosistem yang sangat kaya akan keanekaragaman hayati, termasuk mikroorganisme. Mikroorganisme laut khususnya bakteri, telah menunjukkan adaptasi unik terhadap kondisi lingkungan ekstrem. Adaptasi ini menyebabkan mikroorganisme laut memiliki metabolit sekunder dan enzim yang unik, termasuk enzim-enzim dengan aktivitas proteolitik. Enzim proteolitik merupakan kelompok enzim yang berfungsi untuk menghidrolisis ikatan peptida dalam protein, dan telah dikenal luas karena peranannya dalam berbagai proses fisiologis dan patofisiologis. Salah satu potensi utama enzim proteolitik adalah sebagai protein terapeutik, terutama dalam penanganan penyakit-penyakit berat seperti sepsis, infark miokard, dan hemofilia. Penelitian ini bertujuan untuk mengeksplorasi aktivitas proteolitik dan mengetahui karakteristik morfologinya dan biokimianya. Alur penelitian ini dimulai dari peremajaan isolat bakteri WaN 4 asal Pantai Papuma, Jember yang sebelumnya sudah disimpan dengan metode cryo conserved. Karakterisasi isolat dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis dengan mengamati morfologi koloni maupun sel bakteri. Karakterisasi biokimia dilakukan dengan uji hidrolisis gelatin, uji hidrolisis pati, uji katalase dan uji fermentasi karbohidrat. Uji aktivitas proteolitik pada penelitian ini menggunakan dua metode yakni uji aktivitas proteolitik koloni bakteri dan uji aktivitas proteolitik ekstrak kasar bakteri pada media SMA. Uji aktivitas proteolitik koloni diindikasikan dengan terbentuknya zona bening pada sekitar koloni. Sedangkan uji proteolitik ekstrak kasar diawali dengan pengukuran konsentrasi protein untuk mengetahui aktivitas proteolitik enzim yang dihasilkan oleh ekstrak kasar. Hasil ekstraksi kasar bakteri juga diuji pada media SMA. Aktivitas proteolitik ditandai dengan terbentuknya zona bening pada sekitar sumuran yang menandakan enzim dapat menghidrolisis protein.Hasil dari penelitian ini diperoleh karakteristik isolat WaN 4 berbentuk bulat, berwarna putih kekuningan, dengan tepi entire dan elevasi flat. Isolat bakteri WaN 4 termasuk dalam Gram negatif dengan bentuk sel batang. Isolat WaN 4 menunjukkan keberhasilan dalam positif menghidrolisis gelatin, uji katalase dan negatif pada uji hidrolisis pati. Namun pada uji fermentasi karbohidrat tidak dapat diinterpretasikan. Isolat bakteri positif WaN 4 memiliki kemampuan untuk menghidrolisis protein pada media SMA dengan nilai indeks proteolitik sebesar 0,55 0,057, yang termasuk dalam kategori rendah. Ekstrak kasar dari isolat WaN 4 memiliki kandungan protein total sebesar 1,500 mg/mL. Ekstrak kasar yang diuji untuk aktivitas proteolitik memiliki nilai indeks proteolitik sebesar 2,7 ± 0,32, yang masuk dalam kategori sedang. Penelitian ini bertujuan sebagai eksplorasi potensi dalam penemuan bakteri asal laut penghasil enzim proteolitik.