| dc.description.abstract | Pengembangan tanaman tebu dengan menggunakan teknologi rekayasa
genetik hingga saat ini masih terus dilakukan. Rekayasa genetik dapat dilakukan
melalui proses transformasi gen dengan memanfaatkan peran bakteri
Agrobacterium tumefaciens sebagai vektor. Melalui rekayasa genetik dengan
teknik penyisipan materi genetik seperti gen SPS (sucrose phosphate synthase)
dapat menyebabkan overekspresi SPS pada tanaman target. Gen SPS merupakan
gen pengkode sintesa enzim SPS yang mengkatalisis reaksi pembentukan sukrosa
di sitosol. Berdasarkan sejumlah penelitian, diketahui bahwa enzim SPS
merupakan enzim kunci dalam biosintesis sukrosa (Huber and Huber, 1996;
Laporte et al., 2001). Melalui overekspresi SPS diharapkan dapat meningkatkan
kandungan sukrosa pada tanaman tebu.
Pada penelitian ini, gen SoSPS1 dikonstruk dalam plasmid pCL4 dan
disisipkan ke dalam Ti-plasmid Agrobacterium tumefaciens strain GV3101.
Tujuan dari penelitian yang dilakukan adalah untuk melihat efektifitas
transformasi gen SoSPS1 dengan menggunakan promoter RUBQ2 dalam vektor
ekspresi pCL4 pada tanaman tebu.
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Biologi Dasar, Fakultas MIPA,
Universitas Jember pada bulan Agustus 2010 sampai Mei 2012. Bahan dan alat
yang digunakan meliputi, tunas lateral tanaman tebu yang diregenerasikan
menjadi tanaman tebu in vitro; A.tumefaciens strain GV3101, gen SoSPS1 dalam
plasmid pCL4 (GV3101-pCL4-SoSPS1), media YEP (yeast-extract peptone),
media MS (Murashige Skoog), DNA elektroforesis (BioCraft;Biomed);
spectrophotometer (Hitachi U-2000 Type dual beam); LAF (Laminair Air Flow);
Sentrifuge (Sorvall Type RC 5B Plus SS-34), microsentrifuge (Tommy MRX
150); alat diseksi. Pengamatan meliputi; konfirmasi keberadaan pCL4-SoSPS1 di
dalam Agrobacterium tumefaciens dengan menggunakan analisa PCR
(Polymerase Chain Reaction), pengamatan persentase keberhasilan aklimatisasi,
dan deteksi keberadaan gen SoSPS1 pada genom tanaman putatif transforman. | en_US |
