SKRINING TANAMAN PADI TRANSGENIK OVEREKSPRESI GEN SoSPS1 MENGGUNAKAN ANTIBIOTIK KANAMYCIN

Abstract

Tanaman transgenik merupakan tanaman yang telah direkayasa genetiknya, salah satunya yaitu dengan melalui proses transformasi . Salah satu gen yang ditransformasikan ke dalam genom tanaman adalah gen SPS. Gen SPS merupakan gen yang menjadi kunci dalam sintesis sukrosa pada tanaman. Gen tersebut mengkatalis fructose-6-phosphate (F6P) dan uridine-5-diphospho glucose (UDPG) menjadi sucrose-6-phosphate (suc6P). Proses selanjutnya yaitu terjadi pemutusan phosphate pada suc6P oleh enzim sucrose phosphate phosphatase (SPP) dan menghasilkan sukrosa. Transformasi gen SPS pada tanaman telah banyak dilakukan, diantaranya adalah pada tanaman tebu, tembakau, dan padi. Pewarisan gen SoSPS1 pada tanaman transgenik hasil transformasi gen SoSPS1 pada padi Indica cv. Inpari 14 generasi selanjutnya belum diketahui sehingga perlu dikonfirmasi adanya gen SoSPS1 pada tanaman tersebut. Selain itu, untuk memperoleh tanaman transgenik homozigot perlu diketahui rasio segregasi pada keturunan berikutnya. Berdasarkan latar belakang tersebut perlu dilakukan penelitian mengenai konfirmasi keberadaan gen SoSPS1 dan rasio segregasi Mendel pada tanaman padi overekspresi gen SoSPS1 generasi T4. Penelitian ini dilakukan dengan melakukan skrining 7 event tanaman padi transgenik overekspresi gen SoSPS1 dan menghitung rasio fenotip tanaman transforman dengan tanaman nontransforman. Data yang diperoleh dianalisis chi square dengan rasio yang diharapkan 3:1. Tahap selanjutnya yaitu mengkonfirmasi adanya gen SoSPS1 melalui analisis PCR. Berdasarkan skrining tanaman transgenik pada generasi T4, dan analisis chi square dengan derajat kebebasan 0,05 diperoleh 4 tanaman yang memiliki rasio segregasi 3:1. Hasil skrining juga menunjukkan tidak adanya tanaman homozigot sehingga pada generasi ini pewarisan gen SoSPS1 masih belum stabil. Berdasarkan konfirmasi PCR, dari 14 tanaman yang dianalisis diperoleh 12 tanaman positif transforman sedangkan 2 tanaman lainnya tidak terkonfirmasi mengandung gen SoSPS1 karena diduga chimera.