RESPON IMUNOGENITAS ANTIBODI POLIKLONAL IgY TERHADAP PROTEIN ADHESI PILI 95 kDa Shigella dysenteriae

Abstract

Diare merupakan penyebab utama kematian bayi dan balita di Negara berkembang. Sekitar 15% dari seluruh kasus kematian balita akibat diare di seluruh dunia adalah disentri yang disebabkan oleh Shigella sp. (WHO, 2005). Di Indonesia, surveillance yang pernah dilaksanakan di Jakarta periode Februari 2005 sampai September 2007 pada anak usia 0-14 tahun menemukan bahwa 63,2% pasien diare adalah akibat infeksi Shigella sp. (Shigellosis) (Hernawa et al., 2010). Invasi bakteri Shigella pada epitel usus dapat diperantarai oleh pili yang ada pada permukaan dinding bakteri. Bakteri Shigella dysenteriae kemudian akan menempel dan membuat koloni pada epitel usus yang akhirnya menimbulkan manifestasi klinis pada penderita. Untuk mengkonfirmasi hal tersebut diperlukan adanya pembuktian bahwa protein sub-unit pili bakteri Shigella dysenteriae merupakan molekul adhesin dari bakteri. Protein adhesi dideteksi tubuh sebagai antigen dan akan berperan dalam menginduksi respon imun untuk menghasilkan antibodi. Penelitian ini dilakukan untuk membuktikan bahwa protein adhesi pili Shigella dysenteriae dengan berat molekul 95 kDa bersifat imunogenik. Dalam penelitian ini digunakan ayam petelur jenis Lohmann sebagai penghasil antibodi poliklonal IgY dengan cara menyuntikkan protein adhesi pili Shigella dysenteriae secara subkutan pada sayap ayam bagian bawah. Antibodi poliklonal yang telah terbentuk selanjutnya dideteksi melalui kuning telur ayam dan diuji hambat hemaglutinasi serta uji hambat adhesi bakteri Shigella dysenteriae. Manfaat dari penelitian ini dapat dikembangkan sebagai alat diagnostik berbasis molekul adhesi serta dapat dikembangkan sebagai vaksin terutama yang

berasal dari protein adhesi pili S. dysenteriae. Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratoris dengan rancangan penelitian eksperimental semu (quasy eksperimental design) yang dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember pada September 2012 sampai Agustus 2013. Berdasarkan hasil penelitian pada uji hambat hemaglutinasi diketahui bahwa antibodi poliklonal IgY yang dihasilkan dari protein adhesi pili 95 kDa S. dysenteriae mampu menghambat proses hemaglutinasi eritrosit mencit sampai pengenceran ½, sementara pada pengenceran selanjutnya dimana konsentrasi antibodi poliklonal semakin kecil didapatkan hasil negatif yang berarti terjadi hemaglutinasi pada eritrosit. Sedangkan pada uji hambat adhesi didapatkan hasil bahwa bakteri yang banyak menempel pada sel enterosit adalah kelompok kontrol, kemudian dilanjutkan pada kelompok dengan konsentrasi antibodi terkecil, dan yang paling sedikit menempel adalah pada kelompok dengan konsentrasi antibodi terbesar. Hal ini menunjukkan bahwa, semakin sedikit jumlah antibodi poliklonal yang diberikan, maka akan semakin banyak bakteri S. dysenteriae yang menempel sehingga indeks adhesinya meningkat. Hasil uji statistika regresi linier menunjukkan bahwa nilai R square = 0,783 yang berarti bahwa sebanyak 78,3% dari nilai indeks adhesi dipengaruhi oleh variabel besarnya konsentrasi protein antibodi poliklonal yang diberikan, sedangkan sisanya dipengaruhi oleh faktor lain diluar konsentrasi antibodi poliklonal. Kesimpulan dari penelitian ini adalah protein adhesi pili dengan berat molekul 95 kDa dari S. dysenteriae bersifat imunogenik sehingga mampu menginduksi respon imun humoral pada ayam yang kemudian menghasilkan antibodi poliklonal IgY, serta dapat menghambat hemaglutinasi eritrosit dan menghambat adhesi bakteri S. dysenteriae pada sel enterosit mencit.