PRODUKSI XILOOLIGOSAKARIDA DARI HIDROLISIS OAT-SPELT XYLAN OLEH DIALISAT ENZIM XILANASE SERTA DETEKSINYA SECARA KROMATOGRAFI

Abstract

Xilooligosakarida adalah polimer linear xilosa yang dihubungkan oleh ikatan 1,4- . Sebagai salah satu oligosakarida, xilooligosakarida telah diproduksi terkait dengan karakteristik fungsionalnya yang menguntungkan, terutama aktivitas prebiotiknya. Xiloöligosakarida berpotensi meningkatkan pertumbuhan selektif Bifidobacterium spp., yang memiliki efek biologis penting karena mampu menekan aktivitas bakteri intestinal patogen dan enteroputrefactive yang terkait dengan produksi asam lemak berantai pendek, serta memfasilitasi absorpsi nutrien. Pada penelitian ini telah dilakukan produksi dan karakterisasi xilooligosakarida yang sebelumnya ditentukan pula beberapa parameter yang mendukung produksinya. Parameter tersebut adalah kondisi optimum hidrolisis (waktu inkubasi dan kadar substrat) oat-spelt xylan oleh dialisat enzim xilanase berdasarkan aktivitas enzim yang dihasilkan, affinitas dialisat enzim xilanase terhadap substrat xilan dan kecepatan reaksi hidrolisisnya, serta deteksi produk hidrolisis oat-spelt xylan oleh dialisat enzim xilanase melalui kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Berdasarkan hasil penelitian berhasil diungkap bahwa kondisi optimum hidrolisis (waktu inkubasi dan kadar substrat) oat-spelt xylan oleh dialisat enzim xilanase masing-masing tercapai pada inkubasi 15 jam dan kadar substrat 8,195 mg.ml-1. Affinitas dialisat enzim xilanase terhadap substrat xilan berdasarkan nilai Km sebesar 8,195 mg.ml-1 adalah relatif tinggi dengan kecepatan reaksi hidrolisisnya sebesar 0,169 μmol.menit-1.mg-2. Produk hidrolisis oat-spelt xylan oleh dialisat enzim xilanase melalui deteksi dengan kromatografi lapis tipis menunjukkan terbentuknya xilooligosakarida dan xilosa, sedangkan berdasarkan kromatografi cair kinerja tinggi menunjukkan terbentuknya xilooligosakarida, xilosa, dan arabinosa.