| dc.description.abstract | Ampas tahu merupakan limbah samping dari proses pengolahan tahu dan susu
kedelai. Ampas tahu berpotensi sebagai sumber xilan karena mengandung selulosa
5,6%; hemiselulosa 12,1%; dan lignin 11,7% (Quitain et al., 2004). Hemiselulosa
tersusun oleh rantai utama berupa xilan. Xilan digunakan sebagai substrat endo-β-1,4-
D-xilanase untuk menghasilkan xilooligosakarida. Xilan sintetis berupa xilan oat dan
birchwood kurang diproduksi dan harganya relatif mahal, sehingga menjadi kendala
untuk memproduksi skala besar. Salah satu solusinya adalah memanfaatkan limbah
pertanian sebagai sumber xilan. Xilan ampas tahu telah diekstraksi dan diuji
reaktivitasnya terhadap endo-β-1,4-D-xilanase. Xilan ampas tahu yang digunakan
yaitu xilan ampas tahu yang telah dihilangkan lemak dan protein tanpa penghilangan
lignin (X1nD) dan xilan ampas tahu tanpa penghilangan lemak dan protein tetapi
dilakukan penghilangan lignin (X2D) (Baedho’, 2016). Enzim yang digunakan adalah
endo-β-1,4-D-xilanase dari isolat Bacillus sp. asal abdominal rayap. Tujuan penelitian
ini, antara lain: untuk mengetahui aktifitas endo-β-1,4-D-xilanase dari isolat Bacillus
sp. asal abdominal rayap, konsentrasi substrat dan enzim optimum untuk
menghasilkan xilooligosakarida, dan komponen penyusun xilooligosakarida. Hasil
penelitian diharapkan memberi informasi tentang pemanfaatan ampas tahu dan
meningkatkan nilai ekonomis biomasa xilan pada produksi xilooligosakarida yang
bermanfaat untuk kesehatan.
Tahapan untuk memproduksi xilooligosakarida diawali dengan isolasi endo-β-
1,4-D-xilanase asal isolat bakteri pensekresi endo-β-1,4-D-xilanase. Hasil isolasi berupa ekstrak kasar dimurnikan dengan fraksinasi ammonium sulfat dan dialisis.
Optimasi ammonium sulfat dilakukan untuk mengetahui fraksi yang menghasilkan
aktivitas spesifik optimum. Tiap fraksi ekstrak kasar, hasil fraksinasi, dan dialisat
diuji aktivitas dan kadar proteinnya. Kedua dilakukan hidrolisis endo-β-1,4-Dxilanase
terhadap xilan ampas tahu dengan variasi konsentrasi substrat. Ketiga,
dilakukan hidrolisis endo-β-1,4-D-xilanase terhadap xilan ampas tahu optimum
dengan variasi konsentrasi enzim. Produk hidrolisis yang dihasilkan dianalisis total
gula pereduksi menggunakan spektrofotometer visible pada panjang gelombang 550
nm. Produk hidrolisis pada konsentrasi optimum dianalisis menggunakan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) untuk mengetahui komponen penyusun
xilooligosakarida.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa endo-β-1,4-D-xilanase berhasil diisolasi
ditunjukkan adanya ekstrak kasar dengan aktifitas spesifik sebesar 1.099 U/ml.
Optimasi konsentasi ammonium sulfat optimum dilakukan dari konsentrasi 0-40%,
40-45%, 45-50%, 50-55%, 55-60%, 60-65%, dan 65-70%. Peningkatan aktivitas
spesifik paling optimum terjadi pada fraksi 45-50% sebesar 1,693 U/mg. Fraksi ini
digunakan untuk pemurnian endo-β-1,4-D-xilanase pada skala besar. Aktivitas endo-
β-1,4-D-xilanase setelah diisolasi dan dimurnikan memiliki aktivitas spesifik sebesar
7,623 U/mg. Variasi konsentrasi substrat dilakukan mulai dari konsentrasi 1-15%
dengan rentang 1%. Peningkatan total gula pereduksi hasil hidrolisis variasi substrat
dan enzim diketahui dari perhitungan integral total gula pereduksi. Peningkatan total
gula pereduksi signifikan terjadi pada konsentrasi 6% (X1nD) dan 5% (X2D) dengan
total gula pereduksi sebesar 0,196 mg/ml dan 0,211 mg/ml. Variasi konsentrasi enzim
mulai dari konsentrasi 0,024-0,236 U/ml dengan rentang 0,024 U/ml. Peningkatan
total gula pereduksi hasil hidrolisis secara signifikan terjadi pada konsentrasi 0,165
U/ml untuk X1nD dan X2D dengan total gula pereduksi sebesar 0,278 mg/ml dan
0,202 mg/ml. Produk hidrolisis hasil konsentrasi optimum di analisis menggunakan
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan dibandingkan dengan standar xilosa dan
xilooligosakarida. Spot yang dihasilkan dibandingkan nilai Rf standar dan diperoleh xilotriosa (X3), xilotetraosa (X4), dan xilopentaosa (X5) sebagai penyusun
xilooligosakarida ampas tahu pada X1nD dan X2D.
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa aktivitas endo-β-1,4-Dxilanase
memiliki aktivitas spesifik sebesar 7,623 U/mg. Xilooligosakarida dapat
diproduksi pada kondisi konsentrasi substrat X1nD dan X2D sebesar 6% dan 5%.
Kondisi konsentrasi enzim sebesar 0,165 U/ml mampu memproduksi
xilooligosakarida hampir sama dengan konsentrasi 0,236 U/ml. Kromatogram
xilooligosakarida yang dihasikan mengindikasikan bahwa produk hidrolisis dapat
digunakan sebagai prebiotik | en_US |
