ANALISIS EFEK EKSTRAK POLIFENOL BIJI KAKAO (Theobroma cacao L) TERHADAP UKURAN DAN MORFOLOGI Streptococcus mutans MENGGUNAKAN SCANNING ELECTRON MICROSCOPE (SEM)

Abstract

Salah satu jenis tumbuhan yang dapat dijadikan sebagai obat herbal adalah tanaman kakao yang memiliki banyak manfaat dalam bidang kesehatan. Biji kakao mengandung senyawa polifenol kira-kira 12-18% dari berat kering keseluruhan biji. Senyawa polifenol memiliki aktivitas antibakteri karena mempunyai target pada peptidoglikan dinding sel sehingga dapat menyebabkan kerusakan dinding sel. Polifenol dapat menyebabkan kerusakan dinding sel dan membran sel yang dapat dilihat dari perubahan ukuran dan morfologi sel bakteri. Polifenol bersifat antibakteri terhadap beberapa bakteri patogen dan bakteri kariogenik. Salah satu bakteri kariogenik yang terdapat dalam rongga mulut adalah S. mutans. S. mutans merupakan bakteri yang dominan sebagai penyebab karies gigi dan mempunyai habitat utama dalam plak gigi. Scanning electron microscope menunjukkan kerusakan struktur dinding sel ketika sel bakteri terpapar polifenol. Oleh karena itu, tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kerusakan dinding sel akibat terpapar polifenol yang meliputi perubahan ukuran dan morfologi S. mutans menggunakan scanning electron microscope. Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental laboratorium dengan rancangan the post test only control group design. Pada penelitian ini terdapat lima kelompok terdiri dari empat kelompok perlakuan yaitu P1 (konsentrasi 100%), P2 (konsentrasi 50%), P3 (konsentrasi 25%), P4 (konsentrasi 12,5%) dan satu kelompok kontrol. Pada kelompok perlakuan tabung reaksi diisi bahan perlakuan berupa ekstrak polifenol biji kakao pada konsentrasi yang berbeda-beda, media BHI-B, S. mutans, dan kelompok kontrol berisi media BHI-B dan S. mutans. Kelima tabung reaksi diinkubasi pada suhu 370C selama 10 jam. Selanjutnya mempersiapkan sampel untuk pengamatan kerusakan dinding sel menggunakan SEM memakai metode sesuai viii dengan acuan yang ada di Unit Mikroskop Elektron dan Laboratorium Terpadu Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Pengamatan kerusakan dinding sel dengan SEM meliputi perubahan ukuran dan morfologi sel bakteri. Perubahan morfologi yang terjadi karena kerusakan dinding sel yaitu adanya bentukan tonjolan (blebs) dan ghost cell. Hasil pengamatan menunjukkan adanya perubahan ukuran dan morfologi dinding sel S. mutans (terdapat bentukan blebs dan ghost cell). Pada diameter ukuran sel terdapat perubahan antara kontrol dengan kelompok perlakuan. Bentukan blebs dan ghost cell tidak tampak pada kontrol dan P4, sedangkan pada P1, P2, P3 terdapat bentukan blebs dan ghost cell. Data hasil penelitian berupa perubahan ukuran dianalisis menggunakan uji statistik parametrik one way Anova menunjukkan ada perbedaan yang bermakna (p<0,05) pada semua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana yang berbeda makna (p<0,05) dilanjutkan dengan uji LSD. Data hasil penelitian berupa perubahan morfologi dianalisis menggunakan uji statistik non parametrik. Uji statistik Kruskal-Wallis untuk perubahan morfologi berupa bentukan blebs dan ghost cell menunjukkan ada perbedaan yang bermakna (p<0,05) pada semua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana yang berbeda makna (p<0,05) dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney. Hasil uji Mann Whitney menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna (p<0,05) antar masing-masing kelompok perlakuan. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak polifenol biji kakao mengakibatkan perubahan ukuran dan morfologi (bentukan tonjolan (blebs) dan ghost cell) pada bakteri S. mutans dengan konsentrasi yang berbeda.