SINTESA VITAMIN C-ESTER SECARA ENZIMATIS DENGAN MENGGUNAKAN BIOKATALISATOR LIPASE TERIMMOBILISASI

Abstract

. Lipase (triacylglycerol acylhydrotasc. EC 3.1...3) yang termasuk dalam famili esterase secara alami mengkatalitik terjadinya hidrolisis pada ikatan ester. Pemanfaatan lipase sebagai biokatalisator dibidang industri telah banyak dilaporkan seperti farmasi, kosmetik. makanan dan sintest: bahan aktif. Untuk meningkatkan kegunaan terutama pada subtrat dan kondisi tertentu. perIu dilakukan pemurnian dan immobitisasi lipase. Tujuan Dari penelitian ini adalah sintesa vitamin C-ester dengan meningkatkan kemampuan katalitik lipase dari Aspergillus niger dengan cara melakukan purifikasi dan immobilisasi enzim pada beberapa jenis solven yang berbeda berdasarkan nilai log P dari - 0.76 - 3.5. Purifikasi lipase dilakukan dengan menggunakan fraksinasi ammonium sulfat dan kombinasi kolom kromatografii seperti Sephadex 0-25 dan DEAF cellulose. Pada akhir purifikasi diperoleh total aktivitas sebesar 33x101 unit dengan aktivitas spesifik sebesar 2K54.56 unit/mg protein. Setelah dirunmingka pada gel elektroforesis (SDS PAGE) pada konsentrasi 12.5%. protein lipase menunjukan pita tunggal dengan berat molekul kurang Iebih 29 kD setelah dibandingkan dengan marker protein. Immobilisasi lipase dilakukan dengan menggunakan diatemaceous earth sebagai carrier agent/ celite 545. Etyl Methyl Ketone (EMK) dengan log P 0.2.9 merupakan media yang baik untuk terjadinya sintesa vitamin C-ester dengan kondisi suhu reaksi 40'C selama 24 jam . Rate of flow (RF) dari hasil sintesa sebesar 0.82. nilai ini sama dengan nilai RF pada standart Vitamin. C-ester. maka dapat disimpulkan hahwa senyawa yang tersintesa adalah Vitamin C-ester.