Peran Outer Membrane Protein (OMP) 23 kDa Bakteri Klebsiella pneumoniae sebagai Protein Hemaglutinin dan Adhesin

Abstract

Klebsiella pneumoniae merupakan patogen oportunistik yang dapat menyebabkan infeksi pada alveoli paru (pneumonia), infeksi saluran kencing, bakterimia, abses liver dan beberapa penyakit lain (Brisse, 2009; Pacsoza dan Meczas, 2016). Klebsiella pneumoniae memiliki beberapa faktor virulensi yang digunakan untuk melawan pertahanan tubuh inang yang terdiri dari kapsul polisakarida, lipopolisakarida, faktor adhesin fimbrial dan nonfimbrial (Brisse, et al., 2009). Pili dan Outer Membrane Protein (OMP) merupakan contoh dari protein adhesin. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui peran OMP 23 kDa K. pneumoniae sebagai protein hemaglutinin dan adhesion. Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian observasional untuk mengetahui berat molekul OMP K. pneumoniae dan mengetahui OMP 23 kDa berperan sebagai protein hemaglutinin dan adhesin. Sampel berupa bakteri K. pneumoniae yang diambil dari isolat malang yang terdapat di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember. Variabel bebas pada uji adhesi pada penelitian ini adalah beberapa konsentrasi OMP 23 kDa yang dilakukan dengan pengenceran OMP 23 kDa, sedangkan variabel tergantung adalah indeks adhesi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel bakteri isolat malang adalah bakteri K. pneumoniae. Dibuktikan dengan pewarnaan Gram menunjukkan gambaran bakteri Gram negatif dan berbentuk batang. Selain itu dibuktikan dengan uji biokimiawi didapatkan hasil pada uji TSIA pada media terjadi perubahan warna kuning pada bagian butt dan slant. Pada uji Indol didapatkan hasil negatif, Methyl Red (MR) negatif, Voges-proskauer (VP) positif dan sitrat positif. Kemudian bakteri dilakukan elektroforesis untuk mengetahui berat molekul OMP pada bakteri tersebut. Pada penelitian ini OMP K. pneumoniae memiliki berat molekul 32 kDa, 26 kDa, 23 kDa, 20 kDa, 17 kDa dan 12 kDa. Band dengan protein yang menunjukkan 23 kDa dipotong kemudian dilakukan elektroelusi dan dialisis dilanjutkan dengan uji hemaglutinasi dan uji adhesi. Pada uji hemaglutinasi didapatkan hasil bahwa proses hemaglutinasi terjadi pada pengenceran 1/2 dan 1/4 dengan titer hemaglutinasi pada pengenceran 1/4. Uji adhesi dilakukan dengan cara mencampurkan sel enterosit mencit dengan OMP 23 kDa yang diencerkan dengan titer pengenceran 0 (kontrol), 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10.000. Didapatkan hasil bahwa semakin tinggi konsentrasi maka indeks adhesi semakin kecil. Sehingga pada uji adhesi ini dibuktikan bahwa protein hemaglutinin OMP 23 kDa berperan sebagai protein adhesin. Hasil perhitungan indeks adhesi kemudian dilakukan uji normalitas, uji korelasi dan regresi. Didapatkan hasil uji normalitas dengan data yang terdistribusi normal dengan nilai p> 0,05. Karena data terdistribuasi normal maka dilakukan uji korelasi dengan menggunakan uji korelasi pearson. Hasil uji korelasi didapatkan nilai p<0,05 yaitu p=0,006 dan nilai r= - 0,667 yang artinya besar konsentrasi dan indeks adhesi memiliki hubungan yang signifikan dan memiliki kekuatan hubungan yang tergolong kuat dengan arah hubungan yang negatif. Karena memiliki hubungan yang kuat maka dilanjutkan dengan uji regresi linier untuk mengetahui seberapa besar pengaruh titer pengenceran terhadap indeks adhesi. Hasil uji regresi didapatkan nilai R2 = 0,459 (45,9%) artinya konsentrasi OMP 23 kDa berpengaruh 45,9% terhadap indeks adhesi.