Efektivitas Ekstrak Thymoquinone Jintan Hitam terhadap Pembentukan Pembuluh Darah Baru (ANGIOGENESIS) Soket Gigi Pasca Ekstraksi pada Model Tikus Diabetes

Abstract

Diabetes Melitus (DM) ditandai dengan peningkatan kadar gula darah (KGD) atau hiperglikemia, dapat meningkatkan interaksi antara glukosa dengan molekul penyusun sel tubuh (protein, lemak). Interaksi ini menghasilkan produk modifikasi advanced glycation end products (AGEs) yang menyebabkan perubahan fungsi sel dan jaringan sehingga terjadi komplikasi pasca ekstraksi pada penderita DM. Terapi pencegahan dengan bahan sintetis memiliki efek samping sehingga terjadi peningkatan minat masyarakat terhadap pengobatan tradisional dan herbal dengan memanfaatkan berbagai macam tanaman. Jintan hitam (Nigella sativa L.) mengandung Thymoquinone yang bersifat anti-diabetik dan dapat mempercepat pembentukan pembuluh darah baru (angiogenesis) secara in-vitro. Pemberian ekstrak Thymoquinone pada kondisi DM diduga efektif dalam proses pembentukan pembuluh darah baru soket gigi pasca ekstraksi. Penelitian eksperimental laboratoris pada tikus Wistar jantan ini menggunakan rancangan the post-test only control group design. Sampel berjumlah 27 ekor, berat 150-250 gram, nilai KGD acak (<135 mg/dL) dan sehat. Model tikus diabetes diperoleh dengan injeksi streptozotocin (STZ) secara intravena pada ekor tikus dengan dosis 50 mg/kg BB tikus. Tikus dengan KGD acak ≥ 250 mg/dL dikategorikan positif DM, dan dibagi menjadi kelompok perlakuan 1 (ekstrak Thymoquinone; 80 mg/kg BB tikus), perlakuan 2 (metformin; 100 mg/kg BB tikus) dan kontrol (aquadest). Tiap kelompok dibagi menjadi 3 subkelompok berdasarkan hari pengamatan yaitu hari ke-3, ke-7 dan ke-10 pasca ekstraksi (H-3, H-7 dan H-10); tiap subkelompok terdiri dari 3 sampel. Larutan perlakuan diberikan secara intragastrik sejak hari ke-1 positif DM. Hari ke-7 pasca perlakuan, gigi molar kiri rahang bawah diekstraksi dan soket diperluas dengan contra angle lowspeed round bur no.1 (5000 rpm/2 s). Perlakuan dilanjutkan sampai tikus dilakukan euthanasia dengan metode inhalasi eter sesuai dengan pembagian harinya. Pengukuran KGD tikus dilakukan sebelum dan sesudah induksi DM, sebelum ekstraksi dan sebelum euthanasia. Pemrosesan jaringan dilakukan dengan metode paraffin embedding. Jaringan dipotong secara vertikal dengan ketebalan 5 μm dan diwarnai dengan metode Hematoxylin & Eosin dan Immunohistokimia (IHC). Pengamatan dilakukan dengan perbesaran 40x dan 1000x pada 1/3 apikal soket gigi bagian mesial dan distal sebanyak 20 lapang pandang. Angiogenesis atau pembentukan pembuluh darah baru diamati melalui ekspresi VEGF (vascular endothelial growth factor). Jumlah ekspresi VEGF dihitung berdasarkan jumlah sitoplasma sel endotel dan monosit yang terwarnai coklat dan telah membentuk lumen. Hasil penelitian menunjukkan nilai rata-rata KGD kelompok Perlakuan 1 hari ke-10 mencapai nilai terendah meskipun masih diatas normal. Hasil pengamatan gambaran HPA menunjukkan rata-rata jumlah ekspresi VEGF soket gigi pasca ekstraksi terus mengalami peningkatan dari hari ke-3 hingga hari ke-7, namun mengalami penurunan pada hari ke-10. Hal ini terjadi pada semua kelompok yaitu kelompok kontrol, perlakuan 1 dan perlakuan 2. Peningkatan yang cukup drastis terjadi pada kelompok perlakuan 1 hari ke-3 hingga hari ke-7. Kesimpulan penelitian ini adalah pemberian ekstrak Thymoquinone jintan hitam efektif dapat meningkatkan pembentukan pembuluh darah baru (angiogenesis) melalui mekanisme penurunan KGD.