PEM{]R]\IAN TOKSIN BARU YANG DIISOLASI DARI BAKTERI PHOTORHABDUS ISOLAT LOKAL UNTUK MEMBRANTAS LARVA NYAMUK AEDES AEGYPTI

Abstract

Tujuan dalam penelitian tahun kedua adalah untuk mendapatkan protein tunggal / mumi yang patogenild toksik terhadap larva nyamuk Aedes aegtpti. Penelitian ini dilakukan di laboratorium P.Biologi FKIP dan Laboratorium Biologi Molekuler Universitas Jember dan Laboratorium Dasar Bersama Universitas Airlangga. Metode penelitian ini meliputi pemisahan protein toksin komplek dengan menggunakan kromatografi kolom DEAE Sephacel (anion exchanger), dilanjutkan dengan pemisahan protein toksin dengan Kromatografi kolom Sephadex G-100 (Filtrasi), kemudian dilakukan pemurnian protein toksin dertgan Native- PAGE.langkah berikutnya dilakukan karaktprisasi protein mumi yang meliputi penentuan BM dengan SDS-PAGE, penentuan konsentrasi protein toksin dengan metode Bradford dan uji toksisitas protein toksin. Hasil penelitian menunjukkanbahwa supematan balcteri Photorhabdus luminescens isolat Indonesia berupa protein komplek yang terdiri dari beberapa macam proteul besarnya konsentasi protein adalah,0,155 pg /m\ mempunyai aktifitas etlzim proteolitik dan mempunyai toksisitas terhadap larva instar IV nyamuk Aedes aegtpti, dengan waktu dedah 24 jam, diperoleh besamya toksisitas ( LC so ) adalah 0,0129, sedangkan untuk masa dedah 48 jam besarnya LC so adalah 0,0119. Hasil pemisahan protein supematar bakteri Photorhabdus luminescens isolat lndonesia yang bersifat entomopatogen terhadap larva nyamuk Aedes aeglpti menunjukkan adanya 3 protein utama dengan berat molekul 67 kD4- sedangkan dua band yang kurang jelas menunjukkan berat molekul 29 tDa dan 97 kDa, Protein ini mempunyai toksisitas terhadap larva instar IV nyamuk Aedes aeglpti Tiga protein utama ini mempunyai dayatoksik terhadap larva sasaran yang berbeda Hasil fraksinasi protein dengan kromatografi kolom DEAE didapatkan 3 ftaksi. Pengukuran kandungan protein dengan spetrofotometer pada panjang gelombang 280 nm menghasilkan tiga puncak kelompok protein Ketiga puncak kelompok protein tersebut diuji aktivitasnya. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa puncak I dan puncak II tidak mempunyai al<;tivitas, sedang puncak ke III mempunyai aktivitas terhadap larva nyamuk Aedes aegpti. Hasil pemisahan Protein toksin dengan Kromatografi Kolom DEAE Sephacel (Anion Exchonger) diperoleh satu komponen protein yang mempunyai toksisitas terhadap larva nyamuk Aedes aegtpti. Hasil SDS-PAGE protein toksin menunjukkan satu band dengan berat molekul 67 k.da.. Pemisahan Protein Dengan Kromatografi Kolom Sephadex G-100 (Filtrasi) dihasilkan satu komponen protein yang toksik terhadap larva nyamuk Aedes aegtpti iii